国产一区二区0_国产一区二区三区朝在线观看_日本一区二区免费在线_国产成人久久精品一区二区三区

產品目錄
技術文章
當前位置:首頁 > 技術文章 > 詳細內容

鏈霉菌(放線菌)超聲破碎條件

點擊次數:3653 更新時間:2009-07-07

    放線菌屬于原核生物系統進化樹上的(G+C)摩爾百分含量(mol%)高的革蘭氏陽性菌(Eubacteria)分枝類群,它雖然具有原核生物*的分子生物學特性,但在其不同類群中,細胞壁的化學組分變化很大。在做大腸桿菌超聲時,采用的是400W,破碎5s停5s的方法,效果不錯,但是用在鏈霉菌上,由于細胞壁組成差異一般沒什么效果。

    鏈霉菌(放線菌)超聲破碎前處理一般是配置成一定濃度的菌懸液。使用超聲破碎時采用的具體條件是:
    (1)取細菌的24 h培養液于5 000 r/min 下離心5 min收集菌體。

    (2)用pH 7.5的Na2HPO -NaH2PO 緩沖液洗滌3次,再用該緩沖液將菌體配成1:3的菌懸液。置于40 mL大塑料試管內。

    (3)將大塑料試管置于冰浴中,采用超聲波破碎(功率200W,1/2”探頭,破碎30s,間歇30s)。

    (4)破碎液于12 000 r/min下高速冷凍離心30 min,收集細胞碎片和上清夜。洗滌菌體也可以用預冷的生理鹽水或pH8的Tris-HCl,洗滌一次就可以。另外,超聲劑量隨樣品量、菌體改變比較大,功率可以到400-600w,破碎5s,停5s,冰浴,要加終濃度1 mM的PMSF。為確定合適的超聲強度和次數,有必要隨時鏡檢觀察菌體是否*破碎。



上一篇 穩定性試驗與藥品的有效期 下一篇 橡膠老化概念

分享到:

加入收藏 | 返回列表 | 返回頂部
主站蜘蛛池模板: 夏邑县| 武穴市| 昌黎县| 周至县| 莱西市| 梅河口市| 霍邱县| 焦作市| 澎湖县| 富源县| 泌阳县| 成武县| 达日县| 二连浩特市| 四子王旗| 英山县| 上思县| 绥宁县| 田阳县| 长乐市| 咸宁市| 屯留县| 莱西市| 阳城县| 纳雍县| 比如县| 广东省| 罗甸县| 黄石市| 沁水县| 通城县| 太仆寺旗| 拉萨市| 平和县| 揭东县| 额敏县| 胶南市| 龙山县| 福海县| 博湖县| 江源县|